以小角度中子散射看熱效應對鄰苯二酚加氧酵素結構組態的影響

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題名:	以小角度中子散射看熱效應對鄰苯二酚加氧酵素結構組態的影響
作者:	王湘瑩;Xiang-Ying Wang
貢獻者:	物理研究所
日期:	2001-01-16
上傳時間:	2009-09-22 10:52:27 (UTC+8)
出版者:	國立中央大學圖書館
摘要:	鄰苯二酚加氧酵素是一種苯環的開環酵素，可以用來分解苯環等有機廢料，對清除環境中的有機污染物有很大的貢獻，但是這類酵素的活性穩定度都不高，在高溫環境下其半衰期的時間都很短，造成應用上的一大限制，因此這類酵素活性部位結構的探討，已成為許多生物學家致力研究的方向。本論文利用小角度中子散射實驗，對鄰苯二酚加氧酵素C23Onap(SH1)和C23Onap(NCIB9816-4)做酵素結構組態與溫度效應的研究，同時針對另一酵素C23Otol(mt-2)進行緩衝溶液成份對結構組態熱穩定性的影響。在酵素活性的熱穩定性量測實驗中，酵素的活性半衰期會隨著時間慢慢衰減，但是超過一定的溫度後其活性將會急速下降，在變溫的過程中，酵素活性的衰減機制相同，可能都是因為酵素分子中的二價鐵離子被氧化的結果，但其中以C23Onap(NCIB9816-4)的活性抗熱穩定性比較高。利用小角度中子散射實驗來研究酵素結構組態的熱穩定性，在低溫時酵素的結構組態並沒有因為溫度改變而產生變化，但是當溫度超過其臨界溫度之後，酵素分子的平均大小就明顯隨著溫度升高而急遽增大，同時也發現C23Onap(NCIB9816-4)結構組態改變的臨界溫度要比C23Onap(SH1)高出5℃。這種結構組態的改變主要是因為酵素分 II 子受熱，使其內部的次單位體體積擴張所造成的。經由不同成份緩衝溶液中的樣品實驗，發現在緩衝溶液中添加適量的丙酮能提高結構組態改變的臨界溫度，且在高溫時酵素分子大小隨溫度的變化較為緩和，因此丙酮確實有助於提高酵素結構組態的熱穩定性。
顯示於類別:	[物理研究所] 博碩士論文

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